Citometría de flujo
El recurso compartido de citometría de flujo Proporciona acceso centralizado a tecnologías avanzadas de citometría y soporte técnico especializado para miembros del UNMCCC, laboratorios de la UNM y la comunidad científica en general. El recurso ofrece análisis de citometría de flujo de vanguardia y clasificación celular de alta velocidad mediante un repertorio de modelos de servicio escalables, que incluyen adquisición de servicios completos, flujos de trabajo asistidos y uso independiente, todos ellos adaptados para satisfacer las diversas necesidades y niveles de experiencia de los usuarios.
Los servicios admiten una amplia gama de aplicaciones, incluyendo inmunofenotipado clásico, análisis del ciclo celular y la apoptosis, estudios del microambiente tumoral y de infiltración leucocitaria, y clasificación de células individuales para la generación de líneas monoclonales, la construcción de bibliotecas CRISPR o la integración en flujos de trabajo de clasificación a secuenciación (p. ej., 10x Genomics scRNA-seq). La clasificación en bloque también está disponible para recultivo, trasplante o análisis ómicos posteriores.
El personal experto brinda asesoramiento en diseño de paneles, desarrollo de protocolos, configuración de instrumentos e interpretación de datos para garantizar resultados reproducibles y de alta calidad.
W. Curt Hines, PhD
Director de la facultad, recurso compartido de citometría de flujo
Profesor asociado, Departamento de Bioquímica y Biología Molecular
Sala Fitz Hall 255
915 Camino De Salud NE
Albuquerque, NM 87131
Teléfono: 505-681-0014
Josh Monts, MS
Director técnico, recurso compartido de citometría de flujo
2325 Camino de la Salud, CRF 217
Centro Oncológico Integral de la UNM
Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Nuevo México
Albuquerque, NM 87131
Teléfono: 505-925-0064
Instrumentación de citometría: Analizadores
Aprenda más sobre la Sintonizar NxT- Láseres 405 (6), 488 (2), 561 (3), 640 (3) millas náuticas
- 14 detectores de color
- Constructor de paneles
Tarifa de UNM sin asistencia: $ 94 / hr
Tarifa que no es de UNM: $ 141.94 / hr
Aprenda más sobre la BD Accuri C6- Láseres 488 (3), 640 (1) nanómetro
- 4 detectores de color
- Constructor de paneles
Tarifa de UNM sin asistencia: $ 73 / hr
Tarifa que no es de UNM: $ 110.23 / hr
Aprenda más sobre la cytek aurora- Láseres 405nm, 488nm, 561nm 641nm
- Tres canales de dispersión
- 48 canales de fluorescencia
- Constructor de paneles
Tarifa de UNM sin asistencia: $ 113 / hr
Tarifa que no es de UNM: $ 170.63 / hr
Aprenda más sobre la CytoFLEX S- Láseres 405 (2), 488 (2), 561 (3), 640 (2) millas náuticas
- 9 detectores de color
- Constructor de paneles
Tarifa de UNM sin asistencia: $ 79 / hr
Tarifa que no es de UNM: $ 119.29 / hr
Instrumentación de citometría: clasificadores de células
Aprenda más sobre la CytoFLEX SRT- Láseres 405 (5), 488 (2), 561 (5), 640 (3) nm
- 15 detectores de color
- Constructor de paneles
Tarifa asistida por la UNM
Tarifa del instrumento: $156/hora + Tarifa técnica: $128/hora
Tarifa no UNM
Tarifa del instrumento: $235.56/hora + Tarifa técnica: $181.20/hora
Aprenda más sobre la Velocidad- Detectores de color
- Notas técnicas de la aplicación
Tarifa sin asistencia de la UNM: $ 73 /hr
Tarifa no perteneciente a la UNM: $ 110.23 /hr
Aplicaciones, capacidades y reconocimiento
Recurso compartido de citometría de flujo UNM
MSC 08-4640 UNM CRF 217A
915 Camino De Salud
Albuquerque, NM 87131
Teléfono 505 925 0064
La citometría de flujo se puede utilizar para las siguientes aplicaciones y procedimientos:
- Inmunofenotipaje
- Análisis del ciclo celular y la ploidía tumoral
- Ensayos de proliferación celular
- Actividad enzimatica
- Caracterización y cuantificación de citocinas
- Caracterización de la apoptosis y la necrosis, y viabilidad celular
- Metabolismo celular
- Flujo de calcio intracelular
- Reacciones redox
- Contenido mitocondrial y potencial de membrana
- Eficiencia de transfección
Las licencias de FlowJo están disponibles; consulte el costo.
Los usuarios con licencias de portal activas deben consultar este vídeo guía.
El recurso compartido de citometría de flujo tiene las siguientes capacidades de clasificación de células:
- Clasificación celular masiva: máximo de 4 poblaciones diferentes simultáneamente
- Clasificación de células individuales en placas de pocillos múltiples
- Requiere operación asistida
Las aplicaciones de clasificación incluyen la generación de líneas celulares monoclonales y bibliotecas CRISPR, incluido el enriquecimiento posterior a la transfección y la purificación de una muestra heterogénea para volver a cultivar, trasplantar o secuenciar subconjuntos de células o poblaciones purificadas.
Es política del Recurso que todos los nuevos usuarios se sometan a sesiones de capacitación específicas para la máquina. Estas sesiones de capacitación normalmente constan de dos sesiones diferentes con el administrador central de flujo y un solo usuario. Cada sesión debe durar entre 1 y 2 horas.
Las sesiones de entrenamiento son programado a través de iLabsSi tiene preguntas sobre iLabs o sobre la configuración de cuentas o relaciones públicas para usar el recurso compartido, por favor correo electrónico Palakshi Reddy Bandapalli o llame al 505-272-4539.
El usuario es responsable de proporcionar lo siguiente para su sesión de formación.
Células preparadas @ 1x106/ml en tubos FACS/Eppendorf: la formación de Cytek Aurora requiere tubos FACS
- Sus células deben filtrarse a través de un filtro de 50 μm antes de ejecutar los citómetros.
- El volumen celular debe estar entre 500 y 1000 μL.
Las siguientes celdas son necesarias para el entrenamiento
- Control inmaculado
- Controles de compensación: como controles de un solo color para cada fluorocromo. Se prefieren las microesferas de compensación para marcadores tenues o raros. Se prefieren las células para marcadores de alta expresión.
- Muestras completamente teñidas
Tarifas de formación en instrumentos:
- Tarifa de UNM sin asistencia: $ 192 / hr
- Tarifa que no es de UNM: $ 285.39 / hr
Para reconocer el uso de este recurso compartido, incluya lo siguiente en sus publicaciones:
Esta investigación fue financiada parcialmente por la Subvención de Apoyo al Centro Integral del Cáncer de la UNM NCI P30CA118100 y el recurso compartido de citometría de flujo.
Otro equipo básico
Aprenda más sobre la BioTek Neo2- Lector de placas híbrido multimodo
- Óptica basada en monocromador y filtro independiente
- Mediciones de absorción, fluorescencia, luminiscencia, fluorescencia y polarización
Tarifa de UNM sin asistencia: $ 89 / hr
Tarifa que no es de UNM: $ 134.39 / hr
Aprenda más sobre la MAGPIX- Panel multianalito basado en perlas magnéticas para la cuantificación de biomarcadores
Tarifa de UNM sin asistencia: $ 97 / hr
Tarifa que no es de UNM: $ 146.47 / hr
Pólizas y Procedimientos
Es su responsabilidad leer y comprender esta información.
El recurso compartido de citometría de flujo de UNM proporciona citometría de flujo analítica y servicios de clasificación de células ubicados en CRF 217. Para permitir un funcionamiento fluido y un acceso justo al equipo para todos los investigadores y mantener el equipo en buen estado de funcionamiento, se deben seguir las políticas y procedimientos operativos.
Las políticas operativas clave se describen a continuación.
Las citas para todo el tiempo de uso del instrumento deben programarse en iLabs.
Se requiere la ayuda del operador para la clasificación de células.
Las citas de clasificación celular requieren un mínimo de 24 horas de anticipación. La facturación por clasificación celular comienza cuando comienza su cita; la facturación finaliza cuando finaliza la clasificación. Si su clasificación termina antes, no se le facturará por ese tiempo.
Los usuarios capacitados y aprobados pueden concertar citas para su autooperación el mismo día.
Las citas nocturnas y los fines de semana están autorizadas para uso capacitado y autónomo únicamente.
Aunque las calibraciones y otros procedimientos de mantenimiento son responsabilidad del Flow Core, es importante que los usuarios realicen correctamente los procedimientos de inicio, apagado y limpieza como se describe en las sesiones de capacitación.
La descontaminación y limpieza adecuadas de los tubos de fluidos y la celda de flujo deben seguir cada uso del citómetro.
Los procedimientos de lavado y limpieza posteriores a la adquisición se consideran tiempo de ejecución normal y se facturarán como parte del tiempo total de la cita.
Todos los usuarios deben estar al día con la capacitación en seguridad de laboratorio BSL1 y BSL2 (incluida en la Capacitación en seguridad de la investigación que es obligatoria para todos los investigadores en el campus).
Las muestras BSL3 y radiactivas no están permitidas en nuestras instalaciones bajo ninguna circunstancia.
Los nuevos usuarios de citometría de flujo deben recibir capacitación del personal principal antes de acceder a la instrumentación.
Se espera que los operadores autónomos sean capaces de realizar operaciones normales sin la ayuda del operador de la instalación, incluido el arranque y el apagado, el análisis, la esterilización y el mantenimiento (atascos en las boquillas, etc.).
Tenga en cuenta: si una carrera sin asistencia y operada por usted mismo requiere más de 20 minutos de asistencia del personal, se agregará una tarifa de "tiempo técnico" para convertir la reserva en una sesión parcial o totalmente asistida: uso sin asistencia + tiempo técnico/hora.
Si su carrera está tardando más de lo esperado y se encontrará con el tiempo de otro usuario, tiene derecho a golpearlo en el momento en que su carrera debe comenzar.
Último usuario del día: es responsabilidad del último usuario del día apagar el instrumento analítico. Si la última persona del día no puede llegar a su hora programada, debe informar a la persona antes de apagar la máquina. Si no hay otra persona, la última persona en reserva debe acudir al núcleo de flujo y apagar la máquina.
Las reservas se pueden hacer el día de uso, y deben hacerse en iLabs. Completar el tiempo exacto de uso en los cuadernos por cada instrumento asegura que los cargos serán por su tiempo usado en la máquina.
La capacitación para un solo usuario está disponible solo con cita previa y se realizará utilizando muestras proporcionadas por el investigador.
El personal del núcleo de flujo determinará cuándo el investigador puede operar por sí mismo.
Los usuarios de la instalación son responsables de todo el archivo de datos.
La instalación de recursos compartidos no tiene la capacidad de servir como depósito de datos.
Los usuarios deben reportar problemas en la Instalación de inmediato a Josh Monts at jmonts@salud.unm.edu.
Notificaremos a los usuarios cuando un instrumento no funcione. Si el instrumento en el que hizo su reserva no funciona, haremos todo lo posible para ayudarlo a recopilar sus datos en un instrumento diferente y no aplicaremos el recargo por asistencia.
El director Dr. Curt Hines es el árbitro final de los problemas que surgen en las instalaciones.