Microscopía de fluorescencia e imágenes celulares

Ubicación: CRF219

Detalles del sistema

• Microscopio invertido personalizado Olympus IX83 con platina de escaneo piezoeléctrico Asylum 3D XYZ
• Excelitas Turbo LED multiespectral (campo amplio) y lámpara halógena (campo claro)  
• Objetivo de inmersión en aceite 10X/0.3NA, 20X/0.7NA y 100X/1.4NA
• Cámara CCD monocromática Olympus XM10 
• Cabezal Asylum MFP Origin AFM con recorrido ampliado para preparaciones biológicas
• Software de investigación de asilo para controles AFM
• Software Olympus cellSens para controles de microscopía óptica
• BioHeater para trabajar con células/tejidos vivos
• ¡Se proporcionan sondas de entrenamiento hasta agotar existencias!
• Platos compatibles con AFM: WillCo cubre cámaras inferiores (Ted Pella cat # 14025-20) y platos de cultivo de poliestireno BD Falcon (# 351006)
• Las superficies atómicamente planas (mica o HOPG) para escaneo de alta resolución se pueden encontrar en Ted Pella.com; solicite ayuda

Posibles aplicaciones

• Modo de contacto alterno (CA), también conocido como Modo Tapping, para imágenes a escala nanométrica en preparaciones secas o húmedas
• Modo de contacto para mediciones de fuerza mecánica (módulo elástico, adhesión, sangría y mapeo de fuerza) en preparaciones secas o húmedas 

Ubicación: CRF216

Detalles del microscopio

• Microscopio invertido Leica DMi8 con platina motorizada XY
• Lámpara de fluorescencia de haluro metálico y lámpara de transmisión halógena
• Objetivos 10X, 20X Oil, 25X Water, 63X Water DIC y 63X Oil DIC
• Excitación láser para fluoróforos PA-GFP, DAPI, CFP, YFP, FITC, rodamina y similares a Cy5
• Láser de luz blanca pulsada y sintonizable: 470 - 670 nm
• Dos láseres adicionales: diodo láser de 405 nm y un argón múltiple (líneas de 458, 477, 488, 514 nm)
• Seis detectores: 2 detectores espectrales híbridos * (HyD); 2 SMD espectrales ** HyD, 1 PMT espectral estándar y 1 PMT transmitido (externo)
• Etapa Z de Galvo
• Escáner de resonancia
• Módulo de microscopía de fluorescencia de por vida (FLIM) Pico Harp 300
• Software de adquisición LASX
• Software FLIM SymphoTime64 (PicoQuant)
• Software de desconvolución Huygens
• Incubadora Tokai Hit Stage Top para imágenes de células vivas

* Los HyD son detectores especializados que utilizan fotocátodos GAsP y fotodiodos de avalancha

** Detectores de molécula única (SMD)

Posibles aplicaciones

• Muestras fijas montadas en portaobjetos estándar con cubreobjetos n. ° 1.5
• Muestras de células vivas (LabTekII # 1.5 de múltiples pocillos o cubierta inferior de 35 mm (# 1.5))
• FLIM FRET (fijo o de celda viva)
• Blanqueo del aceptador FRET (fijo)
• Emisión sensibilizada FRET (célula viva)
• FRAP (célula viva)
• Adquisición 3D (Z-Stacks) e imágenes de lapso de tiempo
• Desmezcla multiespectral
• Escaneos de mosaicos multidimensionales de gran área
• Súper resolución a través del procesamiento de restauración de imágenes (~ 130 nm)

Ubicación: CRF226

Detalles del microscopio

• Microscopio invertido Zeiss AxioObserver con platina motorizada XY
• Lámpara fluorescente de halogenuros metálicos y lámpara de transmisión halógena
• Objetivos de inmersión 10x, 20x, 40x aceite, 63x aceite y 63x de inmersión en agua
• DIC disponible con objetivos 10x, 20x, 40x y 63x
• Excitación láser para fluoróforos PA-GFP, DAPI, CFP, YFP, FITC, rodamina y similares a Cy5
• Cuatro láseres de estado sólido: 405 nm, 488 nm, 561 nm, 640 nm
• Detección de canales y espectros: detectores PMT de GaAsP
• Detección simultánea en 3 canales disponibles en modo Canal
• Detector de matriz Airyscan para un aumento de 1.7 veces en la resolución XY
• Detector de luz transmitida
• Sistema de incubación de células vivas: control de temperatura, humedad y CO2
• Software de adquisición de imágenes Zen Blue

Posibles aplicaciones

• Muestras fijas montadas en portaobjetos estándar con cubreobjetos n. ° 1.5
• Muestras de células vivas (LabTekII # 1.5 de múltiples pocillos o cubierta inferior de 35 mm (# 1.5))
• Blanqueo del aceptador FRET (fijo)
• Emisión sensibilizada FRET (célula viva)
• FRAP (célula viva)
• Adquisición 3D (Z-Stacks) e imágenes de lapso de tiempo
• Desmezcla multiespectral
• Escaneos de mosaicos multidimensionales de gran área
• Súper resolución a través del procesamiento de restauración de imágenes (~ 130 nm)

Ubicación: CRF226

Detalles del microscopio

• Microscopio invertido Olympus IX83 personalizado con platina XY motorizada ASI con inserto Z piezoeléctrico.
• LED multiespectral Excelitas Turbo (campo amplio) y LED blanco Lumencor (campo brillante)  
• Objetivos de aceite 20x / 0.8NA, aceite TIRF 60x / 1.5NA, agua 60x / 1.2NA y aceite 100x / 1.4NA
• Compatible con DIC para ópticas de 60x y 100x.
• Controlador de tiempo real de Olympus para sincronización de excitación y cámara con precisión temporal
• Iluminador MITICO TIRF de 4 líneas láser para profundidades de penetración independientes
• 4 líneas láser individuales para TIRF: 405 nm (100 mW); 488 nm (100 mW); 561 nm (100 mW) y 640 nm (140 mW)
• Es posible obtener imágenes con microscopía de reconstrucción óptica estocástica directa (dSTORM), microscopía de localización fotoactivada (PALM) y óptica laminar altamente inclinada (HILO)
• Cámara sCMOS Hamamatsu Fusion y divisor de imágenes Geminini W-View para adquisiciones simultáneas de células en vivo de 2 colores.
• Enfoque automático IR ZDC2 no fotodestructivo para capacidades de enfoque automático continuo o de un disparo extremadamente rápido 
• Calentador objetivo de BiopTechs para aplicaciones de células vivas a corto plazo
• Software de adquisición de imágenes Olympus cellSens Dimension

Posibles aplicaciones

• Muestras fijas con cubreobjetos # 1.5H
• Muestras de células vivas (LabTekII # 1.5H de múltiples pocillos o cubierta inferior de 35 mm (# 1.5H))
• Adquisición 3D (Z-Stacks) e imágenes de lapso de tiempo
• Las aplicaciones específicas incluyen detección de molécula única TIRF de células vivas, HILO, 2D dSTORM o PALM 
• Posprocesamiento habilitado para GPU proporcionado por Huygens Localizer

Ubicación de la cámara: CRF218

Detalles del microscopio

• Microscopio invertido Olympus IX-71 invertido
• Lámpara de fluorescencia de mercurio y lámpara de transmisión halógena
• Monocromador: rango de excitación de 350 nm a 670 nm
• Láseres: 405nm, 488nm, 520nm y 642nm
• Objetivos TIRF 20x, 60x H2O, 100x Oil, 150x Oil
• Filtros de fluorescencia para Quantum Dots, DAPI, FITC y fluoróforos tipo Rhod, Fura-2, Indo-1
• Software de adquisición de imágenes Andor IQ
• Calentador objetivo y dispositivos de patología sistema de incubación de células vivas con CO2, calor, humedad
• Etapa motorizada XYZ
• Cámara Andor iXon EM-CCD
• Divisor de imagen Opti-split (dual)

Posibles aplicaciones

• Muestra fija montada en portaobjetos
• Imágenes de células en vivo con calentador de objetivos
• Seguimiento de una sola partícula
• Fluorescencia de reflexión interna total (TIRF)
• Imágenes de relación métrica (excitación dual / emisión única o emisión dual de excitación única)
• Células vivas en cultivo
• Fluorescencia de campo amplio: muchos fluoróforos posibles con monocromador
• Pilas Z y series de tiempo

Ubicación de la cámara: CRF212

Detalles del microscopio 

• Microscopio de fluorescencia invertido Zeiss AxioObserver
• Cámara monocromática Hamamatsu ORCA Flash4.0v2 sCMOS (100 fps a resolución completa 2048x2048)
• Lámpara fluorescente de halogenuros metálicos y lámpara de transmisión halógena
• Objetivos 10x, 20x, 63xDIC Oil y 100x Oil
• Contraste de fase para objetivos 10x y 20x
• Los juegos de filtros de fluorescencia incluyen: DAPI, FITC, Rhodamine / TRITC / Cy3, Texas Red & Cy5
• DIC disponible con objetivos 63x
• Calentador de objetivo (objetivo de agua 63x) o Portaobjetivos motorizado para apilamiento en Z
• Etapa XY motorizada para la adquisición de imágenes de múltiples posiciones (imágenes de lapso de tiempo de celda fija o en vivo)
• Software de adquisición de imágenes SlideBook6

Posibles aplicaciones 

• Muestra fija montada en portaobjetos
• Células vivas en plato de cubreobjetos / calentamiento con calentador objetivo
• DIC (no confocal) con objetivos de 63x, combinado con fluorescencia o solo
• Imágenes de series de tiempo, montaje y pilas en Z

Ubicado en CRF224 y CRF226

Software

• Imágenes de volumen científico de deconvolución Huygens (1)
• Libro de diapositivas (1)
• EstereoInvestigador (1)
• neurolucida (1)
• LASX (Leica confocal) (1)
• IQTL (análisis de escáner de tifones) (1)
• zen (2)  
• LSM510 (2)
• Software de imágenes espectrales Nuance (2)

Opciones de analisis

• Co-localización
• Desconvolución
• Desmezcla espectral
• Análisis de intensidad
• Análisis morfológico
• Representación 3D
• Conteo de objetos
• Seguimiento de partículas
• Preparación para publicación

Ubicado en CRF214

Typhoon FLA 7000 es un escáner láser rápido y versátil para aplicaciones de imágenes biomoleculares que incluyen:

• mediciones sensibles y cuantitativas de marcadores radioisotópicos
• Western blots quimifluorescentes
• fluorescencia simple (excitación visible)
• documentación de tinciones colorimétricas (p. ej., geles teñidos con azul de Coomassie y plata)

Ubicado en CRF214

Li-Cor Odessey Fc es un escáner de infrarrojo cercano (680 nm y 740 nm) para aplicaciones de imágenes biomoleculares que incluyen:

• mediciones sensibles y cuantitativas de Western blots quimioluminiscentes
• documentación de tinciones colorimétricas (p. ej., geles teñidos con azul de Coomassie y plata)

Zeiss AxioObserver - Cámara monocromática Hamamatsu ORCA Flash4.0v2 sCMOS: $ 7 / hora

Leica TCS-SP8/FLIM: $ 55 / hora

Zeiss LSM800: $ 51 / hora

Olympus IX71 Seguimiento de partículas individuales/microscopio de relación métrica (Salón 218): $25/hora

Microscopio Olympus IX83 TIRF/dSTORM (salón 226): $30/hora

Capacitación en todos los instrumentos, imágenes con operador y capacitación en análisis: $ 150 / hora

• Confocal (4 horas)
• Campo Amplio Avanzado (2-3 horas)
• Microscopía de fuerza atómica (4-8 horas)
• Campo Amplio Básico (0.5-1 hora)
• Capacitación en imágenes con operador y análisis (depende del proyecto)